首页>蛋白修饰鉴定>泛素化位点鉴定
泛素化位点鉴定
*此项目适合进行蛋白泛素化位点初步定性，适合蛋白SDS-PAGE和蛋白溶液样本。
泛素化是分子功能强大的调节因子，通常情况下与蛋白的降解有关，也在蛋白分子细胞内定位、DNA损伤反应、突触小泡融合以及免疫和转录过程中起重要作用。需要降解的蛋白质再通过一系列酶级联反应后被标记上泛素标签。
在线咨询
下面是泛素化蛋白酶体系统（UPS）：
- • 泛素被标记在底物上，随后发生一系列酶级联反应包括E1（泛素激活酶），E2（泛素结合酶），E3（泛素连接酶）
- • E1水解ATP之后形成泛素-腺嘌呤，介导后续反应形成硫酯键，并将泛素（Ub）传递给E2
- • 最后通过一系列反应将泛素（Ub）传递给酶底物，去泛素化酶（DUB）可以去除底物上的泛素标签并循环使用
泛素的不同链接方式：
蛋白底物可以发生单一泛素化，多单泛素化，同型多聚泛素化和异型多聚泛素化。
- • 单一泛素化（Monoubiquitination）and 多单泛素化（multi-monoubiquitination）
- • 同型多聚泛素化（Homotypic polyubiquitination）。泛素可以相互连接形成链，并连接在任意的其中7个赖氨酸残基上包括 (Lys6, Lys11, Lys27, Lys29, Lys33, Lys48, and Lys63) ，或者 Met1。在多聚泛素化过程中，还会有一些类泛素化的修饰集团参与，例如 SUMO, NEDD8, and ISG15
- • 异型多聚泛素化（Heterotypic polyubiquitination）。在多聚反应过程中，通过在不同的泛素分子上发生不同的连接集团，可以形成一个混合的泛素化序列。每一个泛素上也可以发生几处修饰，产生分支多聚物
泛素化位点的发现是诸多生物实验的核心，通常来讲赖氨酸残基突变为精氨酸，因为侧链亲质子性因此不能发生泛素化。大多数实验室通过利用经典WB技术和特异性泛素化抗体检测蛋白的泛素化位点，但因为抗体的特异性与敏感性等限制，质谱技术的发展使发现新的泛素化底物和特异泛素化位点成为可能。
Aimsmass提供专业的泛素化位点鉴定服务，泛素化是通过将甘氨酸C端的泛素连接在目标蛋白中赖氨酸的ε-NH2残基上，含有76个氨基酸，分子量大小8.5Kda的多肽。
