蛋白棕榈酰化(准确地说是蛋白质S-酰基化)是指脂肪酰部分，通常是16-碳棕榈酰部分，对选定的蛋白质半胱氨酸的硫酯化反应。本产品是一种基于生物素酰基替换法原理，通过对目标蛋白进行免疫纯化之后经该款试剂盒处理后，并结合LC-MS/MS技术快速检测特定目的蛋白的修饰位点的检测试剂盒。产品中含有配套使用的各种缓冲液，无需再进行其他复杂特定试剂的配置，试剂盒中另含有配套专门使用的离心管装置，缩短实验周期，减少损耗提高成功率。
| 参数 | 规格 |
|---|---|
| 检测原理 | 酰基-生物素交换（ABE）技术结合LC-MS/MS |
| 主要应用 | 特定蛋白的S-棕榈酰化修饰位点鉴定（需先进行靶蛋白免疫沉淀） |
| 检测方法 | 液相色谱-串联质谱（LC-MS/MS） |
| 检测流程 | 封闭 → 还原 → 标记 → LC-MS/MS检测 |
| 样本类型 | 经免疫沉淀纯化后的蛋白样品 |
| 保存条件 | 参见组分表；不同组分4℃或-20℃保存 |
| 运输条件 | 室温运输，不影响产品性能 |
| 试剂名称 | 组分编号 | 体积 | 储存条件 |
|---|---|---|---|
| LB Buffer 1 | Solution I | 38 mL | 4℃ |
| Reducing Reagent | Solution II | 1200 μL | 4/-20℃ |
| LB Buffer 2 | Solution III | 44 mL | 4℃ |
| Blocking Reagent 1 | Solution IV | 120 μL | 4/-20℃ |
| +HA Buffer | Solution V | 2000 μL | 4℃ |
| -HA Buffer | Solution VI | 2000 μL | 4℃ |
| Blocking Reagent 2 | Solution VII | 400 μL | -20℃ |
| 配套离心管装置 | 1套 | ||
| 说明书 | 1份 |
| 试剂名称 | 组分编号 | 体积 | 储存条件 |
|---|---|---|---|
| LB Buffer 1 | Solution I | 8 mL | 4℃ |
| Reducing Reagent | Solution II | 300 μL | 4/-20℃ |
| LB Buffer 2 | Solution III | 9 mL | 4℃ |
| Blocking Reagent 1 | Solution IV | 40 μL | 4/-20℃ |
| +HA Buffer | Solution V | 400 μL | 4℃ |
| -HA Buffer | Solution VI | 400 μL | 4℃ |
| Blocking Reagent 2 | Solution VII | 80 μL | -20℃ |
| 配套离心管装置 | 1套 |
本试剂盒基于酰基-生物素交换（ABE）技术，通过对免疫纯化后的靶蛋白进行三步处理：1）烷基化封闭游离巯基；2）羟胺特异性还原棕榈酰化位点，暴露新巯基；3）生物素化试剂标记暴露的巯基。标记后的蛋白经胰酶消化，生物素化肽段通过链霉亲和素富集，最后通过LC-MS/MS进行修饰位点的鉴定与分析。
可能原因：1）靶蛋白在该样本中无棕榈酰化修饰；2）免疫沉淀效率低，靶蛋白富集不足；3）ABE反应条件不充分；4）质谱检测灵敏度不足或离子化效率低；5）修饰肽段在质谱分析中丢失。建议优化IP条件、验证ABE反应效率，并考虑使用高灵敏度质谱仪。
不同组分保存条件不同：LB Buffer 1/2需4℃保存；Reducing Reagent、Blocking Reagent需4℃或-20℃保存；+HA Buffer、-HA Buffer需4℃保存；Blocking Reagent 2需-20℃保存。建议收到后按说明书要求保存，避免反复冻融。
