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Palmitoylation ALK-16 Click Chemistry Kit for WB
AM10818棕榈酰修饰检测试剂盒

Palmitoylation ALK-16 Click Chemistry Kit for WB

基于点击化学原理,结合Western Blot技术快速检测特定蛋白棕榈酰化修饰的检测试剂盒

产品亮点

高特异性 - ABE 技术专一性标记 S-棕榈酰化硫酯键多规格选择 - 4 次/20 次反应两种规格实验流程短 - 封闭→还原→标记→洗脱→检测仅需 1 天
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产品概述

本产品是一种基于点击化学(Click Chemistry)原理,结合Western Blot(WB)技术快速检测特定蛋白棕榈酰化修饰的检测试剂盒。蛋白棕榈酰化(准确地说是蛋白质S-酰基化)是指脂肪酰部分,通常是16-碳棕榈酰部分,对选定的蛋白质半胱氨酸的硫酯化反应。本试剂盒针对多数研究组织或细胞中特定蛋白S-棕榈酰修饰位点检测所开发,通过点击化学原理对棕榈酰修饰进行探针标记后,按照试剂盒处理流程完成后用免疫印迹的方法进行蛋白棕榈酰位点验证。产品中含有配套使用的各种缓冲液,无需再进行其他复杂特定试剂的配置。

技术参数

参数规格
检测原理点击化学(Click Chemistry)结合ALK-16探针标记
主要应用特定蛋白的S-棕榈酰化修饰检测(Western Blot验证)
检测方法免疫印迹法(Western Blot)
探针类型ALK-16(含炔基棕榈酸类似物)
检测系统链霉亲和素-HRP(Streptavidin-HRP)化学发光检测
样本类型细胞裂解液、组织匀浆等蛋白样品
保存条件参见组分表;主要组分-20℃保存
运输条件冰袋运输,确保试剂活性

试剂盒组分

组分列表(20次反应)

试剂名称(20rnxs)试剂编号体积(正式)储存温度
Palm ProbeSolution I350μL-20℃
4SB BufferSolution II40mL-20℃
Blocking Reagent 1Solution III1100μL-20℃
Blocking Reagent 2Solution IV550μL-20℃
CUAAC BufferSolution V1100μL-20℃
2SB BufferSolution VI45mL-20℃
Capture BeadsSolution VII2600μL4℃
Washing BufferSolution VIII55mL-20℃
Reducing BufferSolution IX5100μL-20℃
Blocking Reagent 3Solution X550μL-20℃

组分列表(4次反应)

试剂名称(4rnxs)试剂编号体积(正式)储存温度
Palm ProbeSolution I60μL-20℃
4SB BufferSolution II7mL-20℃
Blocking Reagent 1Solution III200μL-20℃
Blocking Reagent 2Solution IV100μL-20℃
CUAAC BufferSolution V200μL-20℃
2SB BufferSolution VI8mL-20℃
Capture BeadsSolution VII500μL4℃
Washing BufferSolution VIII10mL-20℃
Reducing BufferSolution IX1000μL-20℃
Blocking Reagent 3Solution X100μL-20℃

实验流程

探针标记 ALK-16探针标记棕榈酰化蛋白
细胞裂解 收集细胞,裂解提取蛋白
点击反应 CuAAC反应连接生物素
Western Blot Streptavidin-HRP检测

实验案例

常见问题

AM10818试剂盒的检测原理是什么?

AM10818试剂盒基于点击化学(Click Chemistry)原理,通过ALK-16棕榈酰化类似物探针标记棕榈酰化蛋白,再通过生物素-链霉亲和素系统进行Western Blot检测。该技术特异性强,灵敏度高,可准确检测特定蛋白的S-棕榈酰化修饰。

试剂盒中的ALK-16探针是什么?

ALK-16是一种含有炔基的棕榈酸类似物,可作为棕榈酰化蛋白的代谢标记探针。它能够被细胞内的棕榈酰转移酶识别并整合到棕榈酰化蛋白中,然后通过点击化学反应与含有叠氮基的生物素分子进行特异性偶联,实现后续检测。

实验流程需要多长时间?

完整实验流程通常需要2-3天:第一天进行细胞培养和探针标记(4-6小时);第二天进行点击化学反应和样品制备(3-4小时);第三天进行Western Blot检测和结果分析(6-8小时)。具体时间可能因实验条件而异。

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