蛋白棕榈酰化（准确地说是蛋白质S-酰基化）是指脂肪酰部分，通常是16-碳棕榈酰部分，对选定的蛋白质半胱氨酸的硫酯化反应。本产品是一种基于生物素酰基替换法原理，并能结合WB技术快速检测全蛋白棕榈酰修饰位点的检测试剂盒。产品中含有配套使用的各种缓冲液，无需再进行其他复杂特定试剂的配置。棕榈酰化蛋白鉴定方法的突破基于点击化学和酰基生物素交换的两种非放射性方法的发展。这些技术为各种细胞和组织中基于质谱的蛋白质棕榈酰化的高通量蛋白质组学分析拓宽了道路。
| 参数 | 规格 |
|---|---|
| 检测原理 | 酰基-生物素交换（ABE）技术 |
| 主要应用 | 全蛋白水平的S-棕榈酰化修饰检测，无需靶蛋白免疫沉淀 |
| 检测方法 | 免疫印迹法（Western Blot） |
| 结果读取 | 链霉亲和素-HRP（Streptavidin-HRP）化学发光检测 |
| 样本类型 | 细胞、组织等全蛋白提取物 |
| 保存条件 | 参见组分表；不同组分储存条件不同 |
| 运输条件 | 冰袋运输，确保试剂稳定性 |
| 试剂名称 | 组分编号 | 体积/数量 | 储存条件 |
|---|---|---|---|
| LB Buffer | Solution I | 10 mL | 4℃ |
| Reducing Reagent | Solution II | 1800 μL | 4℃/-20℃ |
| Blocking Reagent | Solution III | 100 μL | 4℃/-20℃ |
| Diluting Buffer | Solution IV | 10 mL | 4℃ |
| +HAM Buffer | Solution V | 1000 μL | 4℃ |
| -HAM Buffer | Solution VI | 1000 μL | 4℃ |
| BMCC Buffer | Solution VII | 100 μL | 4℃/-20℃ |
| Strepdavidin-HRP | Solution VIII | 40 μL | 4℃/-20℃ |
| 试剂名称 | 组分编号 | 体积/数量 | 储存条件 |
|---|---|---|---|
| LB Buffer | Solution I | 2 mL | 4℃ |
| Reducing Reagent | Solution II | 360 μL | 4℃/-20℃ |
| Blocking Reagent | Solution III | 20 μL | 4℃/-20℃ |
| Diluting Buffer | Solution IV | 2 mL | 4℃ |
| +HAM Buffer | Solution V | 200 μL | 4℃ |
| -HAM Buffer | Solution VI | 200 μL | 4℃ |
| BMCC Buffer | Solution VII | 20 μL | 4℃/-20℃ |
| Strepdavidin-HRP | Solution VIII | 40 μL | 4℃/-20℃ |
Total protein-ABE试剂盒用于检测全蛋白水平的棕榈酰化修饰，无需先进行免疫沉淀；而IP-ABE试剂盒需要先对特定靶蛋白进行免疫沉淀富集。Total protein-ABE适用于高通量筛查，IP-ABE适用于特定蛋白的验证研究。
信号缺失可能原因：1）样本中棕榈酰化修饰水平较低；2）ABE反应步骤（特别是羟胺还原）条件不充分；3）Western Blot检测系统灵敏度不足；4）样本处理不当导致修饰丢失。建议使用阳性对照验证实验体系。
不同组分保存条件不同：LB Buffer、Diluting Buffer、HAM Buffer需4℃保存；Reducing Reagent、Blocking Reagent、BMCC Buffer、Strepdavidin-HRP需-20℃保存。建议收到后按组分表要求储存，避免反复冻融。
