蛋白质异戊烯化是一种普遍存在的共价翻译后修饰，其特征是在位于蛋白质羧基末端附近的半胱氨酸残基上添加法尼基或香叶基类异戊二烯基。它对许多蛋白质的适当定位和细胞活性至关重要。除了在细胞生理学中发挥作用外，异戊烯化过程在人类疾病中也具有重要意义，近年来，它已成为具有治疗潜力的抑制剂的有吸引力的靶点。本产品是一种基于点击化学（Click Chemistry）原理，并结合免疫印迹技术（Western Blot）快速检测全蛋白香叶基化修饰的检测试剂盒。产品中含有配套使用的各种缓冲液，无需再进行其他复杂特定试剂的配置，简化了实验流程，提高了检测效率。
| 参数 | 规格 |
|---|---|
| 检测原理 | 点击化学（CuAAC）结合免疫印迹 |
| 检测目标 | 全蛋白香叶基化（Geranylgeranylation）修饰 |
| 主要应用 | 细胞水平蛋白质异戊烯化修饰研究、药物筛选 |
| 检测方法 | 免疫印迹法（Western Blot） |
| 结果读取 | 链霉亲和素-HRP（Streptavidin-HRP）化学发光检测 |
| 样本类型 | 经探针标记的活细胞裂解液 |
| 保存条件 | 参见组分表；部分组分需-20℃保存 |
| 运输条件 | 冰袋运输，确保试剂活性 |
| 试剂名称 | 组分编号 | 体积 | 储存条件 |
|---|---|---|---|
| Probe reaction buffer (探针反应缓冲液) | Solution I | 260 μL | 4℃ |
| Lysis Buffer (裂解缓冲液) | Solution II | 8 mL | 4℃ |
| CUAAC click labeling Buffer (点击标记缓冲液) | Solution III | 400 μL | 4℃ |
| Blocking Reagent (封闭试剂) | Solution IV | 340 μL | 4℃ |
| Strepdavidin-HRP (链霉亲和素-HRP) | Solution V | 40 μL | -20℃ |
| FTIase inhibitor Buffer (FTI酶抑制剂缓冲液) | Solution VI | 260 μL | -20℃ |
| 详细说明书 | 1份 |
| 试剂名称 | 组分编号 | 体积 | 储存条件 |
|---|---|---|---|
| Probe reaction buffer (探针反应缓冲液) | Solution I | 60 μL | 4℃ |
| Lysis Buffer (裂解缓冲液) | Solution II | 1600 μL | 4℃ |
| CUAAC click labeling Buffer (点击标记缓冲液) | Solution III | 80 μL | 4℃ |
| Blocking Reagent (封闭试剂) | Solution IV | 80 μL | 4℃ |
| Strepdavidin-HRP (链霉亲和素-HRP) | Solution V | 40 μL | -20℃ |
| FTIase inhibitor Buffer (FTI酶抑制剂缓冲液) | Solution VI | 60 μL | -20℃ |
| 详细说明书 | 1份 |
本试剂盒基于点击化学（Click Chemistry）中的铜催化的叠氮-炔环加成反应（CuAAC）。首先使用含炔烃的香叶基探针（Geranyl probe）在活细胞中对异戊烯化蛋白进行代谢标记；细胞裂解后，通过CuAAC反应将生物素连接到标记的蛋白上；最后通过Streptavidin-HRP进行Western Blot检测。
本试剂盒特异性检测香叶基化修饰（Geranylgeranylation）。异戊烯化主要包括法尼基化（Farnesylation）和香叶基化（Geranylgeranylation），本产品针对后者开发，可检测蛋白上添加的20碳香叶基类异戊二烯基团。
完整实验流程约需1.5-2天：1）探针标记活细胞（通常2-24小时，取决于实验设计）；2）细胞裂解（30分钟）；3）点击化学反应标记生物素（2小时）；4）Western Blot（过夜孵育+次日检测）。实际时间可能因具体实验条件而略有调整。
不同组分保存条件不同：Solution I, II, III, IV 建议4℃保存；Solution V (Strepdavidin-HRP) 和 Solution VI (FTIase inhibitor Buffer) 需-20℃保存。所有组分应避免反复冻融，收到后请按说明书要求储存。
