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IP-ABE Palmitoylation Kit For WB 特定蛋白棕榈酰免疫印迹法试剂盒
AM10318棕榈酰修饰检测试剂盒

IP-ABE Palmitoylation Kit For WB 特定蛋白棕榈酰免疫印迹法试剂盒

基于生物素酰基替换法原理,结合Western Blot技术,快速检测特定蛋白棕榈酰化修饰位点的检测试剂盒

产品亮点

高特异性 - ABE 技术专一性标记 S-棕榈酰化硫酯键多规格选择 - 4 次/20 次反应两种规格实验流程短 - 封闭→还原→标记→洗脱→检测仅需 1 天
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产品概述

蛋白棕榈酰化(准确地说是蛋白质S-酰基化)是指脂肪酰部分,通常是16-碳棕榈酰部分,对选定的蛋白质半胱氨酸的硫酯化反应。特定蛋白棕榈酰免疫印迹法试剂盒 AM10318是基于生物素酰基替换法原理开发的专业检测试剂盒,专门用于结合Western Blot技术快速检测特定目的蛋白的棕榈酰化修饰位点。本产品针对多数研究某个特定蛋白棕榈酰修饰位点检测所开发,特别适用于没有IP级别的一抗,以及需要同时检测多种目的蛋白的研究场景。

技术参数

参数规格
检测原理生物素酰基替换法(结合点击化学和酰基生物素交换技术)
主要应用特定蛋白的棕榈酰化修饰位点检测,无需IP级别一抗
检测方法免疫印迹法(Western Blot)
检测试剂Streptavidin-HRP化学发光检测
检测流程封闭 → 还原 → 标记 → 洗脱 → 检测
高通量兼容性支持基于质谱的蛋白质棕榈酰化的高通量蛋白质组学分析
保存条件不同组分4℃或-20℃保存,详见组分表

试剂盒组分

组分列表(20次反应)

试剂名称试剂编号体积储存温度
Lysis BufferSolution I8ml4℃
Reducing ReagentSolution II1200μl4℃/-20℃
Blocking ReagentSolution III120μl4℃/-20℃
PC beadsSolution IV250μl+250μl4℃
+HAM BufferSolution V6000μl4℃
-HAM BufferSolution VI6000μl4℃
Biotin BufferSolution VII350μl4℃/-20℃
BeadsSolution VIII1200μl4℃
Elution Buffer1Solution IX4000μl4℃/-20℃
Elution Buffer2Solution X4000μl4℃/-20℃

组分列表(4次反应)

试剂名称试剂编号体积储存温度
Lysis BufferSolution I1600μl4℃
Reducing ReagentSolution II2400μl4℃/-20℃
Blocking ReagentSolution III40μl4℃/-20℃
PC beadsSolution IV50μl+50μl4℃
+HAM BufferSolution V1200μl4℃
-HAM BufferSolution VI1200μl4℃
Biotin BufferSolution VII60μl4℃/-20℃
BeadsSolution VIII240μl4℃
Elution Buffer1Solution IX800μl4℃/-20℃
Elution Buffer2Solution X800μl4℃/-20℃

实验流程

封闭 封闭游离巯基,准备进行特异性反应
还原 还原处理,去除蛋白上的棕榈酰基团
标记 生物素试剂标记新暴露的巯基位点
洗脱 洗脱纯化标记后的蛋白样品
检测 Western Blot结合Streptavidin-HRP检测

实验案例

常见问题

AM10318试剂盒适合哪些研究需求?

AM10318试剂盒专门为研究特定蛋白棕榈酰修饰位点的检测需求开发。特别适用于:1)没有IP级别一抗的研究;2)需要同时检测多种目的蛋白的情况;3)希望替换传统CM沉淀方式的用户;4)需要结合WB技术快速检测特定目的蛋白修饰位点的实验。

试剂盒的主要检测流程是什么?

AM10318试剂盒采用标准化的五步检测流程:1)封闭游离巯基;2)还原去除棕榈酰基;3)生物素标记新暴露的巯基;4)洗脱纯化;5)Streptavidin-HRP Western Blot检测。流程设计合理,操作简便,易于上手。

试剂盒各组分应如何保存?

不同组分保存条件不同:Lysis Buffer、PC beads、+HAM Buffer、-HAM Buffer、Beads需4℃保存;Reducing Reagent、Blocking Reagent、Biotin Buffer、Elution Buffer需4℃或-20℃保存。具体保存条件请参考试剂盒组分表中的详细说明。

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